2.3培养条件优化实验

　　采用U14（148）均匀设计表进行实验，研究各培养条件对石油降解率的影响。U14（148）均匀设计的实验方案和结果见表3。其中：U1为混合菌接种量，U2为土壤含水率，U3为鸡粪加入量，U4为麦糠加入量，U5为表面活性剂加入量。

　　U14（148）均匀实验数据的处理采用UniformDesign2.10软件，得出回归方程见式（2）。

　　方差分析表中显著性水平为0.001<0.01，回归方程变量间关系是极显著的。菌群的最优培养条件为：混合菌接种量122.0mL/kg、土壤含水率14%（w）、鸡粪加入量90g/kg、麦糠加入量150g/kg和表面活性剂加入量22mL/kg，预测最高石油降解率为67.35%。在最优培养条件下进行验证实验，石油降解率为66.95%，与预测结果的误差为0.59%。实验值与预测值的误差在允许范围之内，说明均匀设计优化的菌群培养条件准确可信。

　　2.4 微生物修复前后土壤性质的对比

　　分别将未经处理的模拟土样、经土著微生物通风堆肥法处理的模拟土样、经混合菌处理（最佳配比及最优培养条件下）的模拟土样记作M1，M2，M3，考察微生物修复前后土壤理化性质、酶活性和微生物种群数量的变化。经过不同处理的模拟土样的性质见表4。

　　由表4可见，M3的修复效果最好，石油降解率达66.95%，而M2的石油降解率仅为5.02%。由于M3在修复过程中投入了大量的营养物质，因此土样中有机质和总氮含量大幅提高；而M2的各指标变化则不如M3的明显。M3中脱氢酶和过氧化氢酶活性最高，这是由于在修复过程中土壤微生物大量繁殖，微生物参与了石油烃的降解过程，使得脱氢酶和过氧化氢酶活性提高。M3中的脲酶活性最高，说明土壤的氮元素转化能力强，有利于土壤中微生物的生长，为微生物参与石油烃的降解提供了充足的营养条件。而M2中各种酶活性的变化均不如M3中明显。M3在细菌、放线菌和真菌的数量方面均明显高于M1和M2，接近于自然界中实际的微生物数量。

　　3、结论

　　a）实验室保藏的A，B，C，D4种高效石油降解菌均可提高微生物修复石油污染土壤的效果。单菌在40d修复过程中的修复效果远远超出土著微生物，且4种单菌石油降解率的高低顺序为：D>C>A>B。

　　b）4种菌混合除油的效果最好，在最佳配比（X1=12%，X2=2%，X3=21%，X4=65%）条件下，40d后土壤的石油降解率达54.50%。

　　c）菌群的最优培养条件为：混合菌接种量122.0mL/kg、土壤含水率14%（w）、鸡粪加入量90g/kg、麦糠加入量150g/kg和表面活性剂加入量22mL/kg；在此条件下，40d后土壤的石油降解率达66.95%。

　　d）经混合菌修复的石油污染土壤，其肥力明显升高，脱氢酶、过氧化酶和脲酶的活性均升高，微生物数量也有明显增加。